实验室离心机应用领域广泛，一般用于医院化验室、科研机构化验室、食品药品检验化验室、食品卫生化验室等各种实验室。今天东南仪诚为大家介绍如何根据实验需求选择离心机、离心管类型，以及离心机操作注意事项和安全风险防范。

一、离心机的分类

按结构类型可分：台式离心机和立式离心机(落地式离心机)

按分离方式可分：过滤离心机和沉降离心机

按速度快慢可分：低速离心机（10000rpm/min）、高速离心机（10000-30000 rpm/min）、超高速离心机（30000rpm/min）

按容量大小可分：微量离心机(微型离心机或迷你离心机)、小容量离心机、大容量离心机和超大容量离心机

按有无冷冻可分：冷冻离心机和常温离心机

另外还按用途的不同进行分类。

二、如何选择离心机的类型

1.当固相物料为结晶产品时，要求分离时结晶的破损程度低

要根据离心机须根据悬浮液(或乳浊液)中固体颗粒的大小和浓度、固体与液体(或两种液体)的密度差、液体粘度、滤渣(或沉渣)的特性来选择。

2.当分离物质颗粒的直径在1微米到50微米之间，可用低速离心机分离

转速大约在4000转/分钟到7000转/分钟，相对离心力约为2000g到9420g， 一般采用台式低速离心机或落地式低速大容量离心机。

3.当分离动植物组织内的病毒等直径约为0.1微米到1微米的物质时，建议采用高速冷冻离心机，转数为 10000转/分钟到20000转/分钟，离心力约为10000g到100000g。

4.当分离各种蛋白质、DNA、RNA等直径约为0.002微米到0.1微米的组分时，则需要用超速离心机，转速在40000转/分钟以上，离心力要求达到100000g到400000g以上。

5.当物料含有苯、甲苯、石油醚、环戊烷；二氯乙烷、四氯化碳、甲醇、乙醇、乙醚、甲乙醚、、丙酮、环已酮、乙二醇-乙醚、乙二醇-丁醚、甲醛、乙醛、吡啶等易燃易爆的物品时，应选择防爆离心机

6.当分离一些有机活性物质如酶等时，需要分离过程中保持恒温时选择冷冻离心机。

三、如何计算离心力

离心分离的沉降效果由相对离心力（RCF： Relative Centrifugal Force）决定。相对离心力定义为离心加速度与重力加速度的比值，按以下计算公式计算得出：（g: 重力加速度，R：离心半径 cm，N: 转速 rpm）

水平转子、角转子、垂直转子的转子离心

四、离心机安装注意事项

1.离心机一般安装在坚固的水平地面或者台面， 避免阳光照射的地方。通过调整4个脚轮旁边的调整螺栓的高低，来调整离心机安装处于水平位置， 注意不要一个脚轮悬空。

2.离心机散热量比较大，周围不要堆放杂物，离心机离周围物品至少30cm以上。同时，离心机尽量单独放在一个房间，周围绝对不要放有机试剂、易爆品、易燃品。

3.离心机应使用稳定的额定电压，最好单独一个插座，外壳必须有可靠接地线。

五、如何选择离心管

玻璃离心管：不能在高、超速离心机上使用，只适用于低速离心机。

PA管和PP管：化学性能稳定，半透明，能耐高温消毒。

PC管：透明度好，硬度大，能耐高温消毒。但不耐强酸强碱及某些有机溶剂。主要用于5万(转/分)以上离心。

CN管：质地较软，透明，但不耐强酸强碱及某些有机溶剂，不能高压消毒。适合于蔗糖、甘油等密度梯度离心。透明，利于收集。

钢制离心管：强度大，不变形，能抗热，抗冻，抗化学腐蚀，应用广泛，但使用时避免接触强腐蚀性的化学药品。

注意：

（1）塑料管使用有机溶剂必须符合与对应材料的相容性规定，聚丙烯(PP)离心管(瓶)不能与汽油、煤油等接触使用。聚碳酸酯(PC)离心管(瓶)不能与汽油、乙醛、丙酮、乙醇、异丁醇、甲酚等接触使用。聚乙烯(PE)离心管(瓶)不能与硫酸(50%、75%)、苯、汽油、煤油等接触使用。

（2）离心管在高温高压下消毒，离心管要和管帽分开，如果拧合后一起消毒，容易引起离心管的变形而在实验过程中发生危险。

六、离心管安装注意事项

1.使用各种离心机时，必须事先在天平上精密地平衡所有的离心管、离心管盖、挂篮和适配件等。平衡时重量偏差不得超过离心机说明书上所规定的范围。

（1）重量配平，一般精密平衡要求偏差不超过0.1g，常规应用则要求一般不超过1g，重量偏差不得超过离心机说明书上所规定的范围。

（2）密度配平，离心管内填充的材料必须密度相近，否则载荷会不均匀地分布。

（3）转子中尽量避免装载奇数个离心管，当转子只是部分装载时应均匀分布，以便使载荷均匀地分布在转子体上。

（4）当为奇数个离心管时，加载平衡的平衡管内必须采用密度相近的材料填充，例如，从培养基中离心细菌，可以用水平衡。但不可以用水来平衡氯化铯。

2.装载溶液时，要根据离心溶液的性质及体积选用适合的离心管依据离心机的具体操作说明进行。

3.当使用无盖离心管时，液体不能装得过多，以免离心时甩出，造成转子不平衡、生锈或被腐蚀。

4.当使用盖密封离心管要求抽真空时，一般要求必须将液体装满，以防止离心时塑料离心管的上部因真空变形。

七、如何选择离心方法

常用的三种离心方法：差速离心法；速率区带离心法；等密度区带离心法。

1.差速离心法

差速离心法

差速离心法常用于生化样品的粗制品提取利用不同的悬浮粒子在离心力场中沉降系数的差别，在同一离心条件下，不同粒子沉降速度不同，通过不断增加相对离心力，使一个非均匀混合液体分散系统中各种大小、形状不同的粒子分层沉淀。

操作过程中一般是在第一级离心后将上清液与沉淀分开，然后将上清液再在更高转速条件下离心，分离出第二部分沉淀，如此往复逐级加高转速，逐级分离出所需要的物质。差速离心的分辨率不高，沉淀系数在同一个数量级内的各种粒子不容易分开，常用于生化样品的粗制品提取。

2.速率区带离心

速率区带离心

速率区带离心是一种不完全的沉降分离，沉降效果受物质本身物理尺度的影响较大，一般应用在物质大小相异而密度相同的情况， 是指根据待分离的粒子在离心力作用下，在梯度液中沉降速度的不同，离心后具有不同沉降速度的粒子处于不同的密度梯度层内，形成几条分开的样品区带，达到彼此分离的目的。

比如要从静脉血中分离出单个核细胞，前一种分离液Ficoll将血液中的所有单个核细胞（淋巴细胞和单核细胞）分为一个层，同时提取。而Percoll分离液将血液中淋巴细胞和单核细胞分为两个梯度层，分别提取。梯度液在离心过程中以及离心完毕后取样时，起着支持介质和稳定剂的作用，避免因机械振动而引起已分层的粒子重悬。

采用速率区带离心法时，需要严格控制离心时间，既要有足够的时间使各种粒子在介质梯度液中形成区带，又要避免任一待分离粒子形成沉淀状态。

3.等密度区带离心法

等密度区带离心法

等密度区带离心是指液体分散体系中不同颗粒存在浮力密度差时，在离心力场下，颗粒或向下沉降，或向上浮起，一直沿梯度移动到它们密度恰好相等的位置上，即等密度点，形成区带的离心方法。

等密度区带离心的离心效果取决于颗粒的浮力密度差，密度差越大，分离效果越好，与颗粒的大小和形状无关，但后两者决定着达到平衡的速率、时间和区带的宽度。

等密度区带离心方法的特点：

（1）与样品粒子的密度有关；

（2）与样品粒子的大小和其他参数无关 ；

（3）转速、温度不变，则延长离心时间也不能改变这些粒子的成带位置。

八、离心机使用注意事项及风险预防

1.离心管平衡时，由于天平长期使用而又未能校对，对称放置的离心管不平衡超过了离心机允许的样品称量误差。

2.离心过程中溶液填充不合理或者未盖罐盖，离心腔内的高真空状态造成离心管破裂和样品液外溢，造成转子不平衡而发生轴弯曲或断轴事故。

3.离心管老化或将高速离心机离心管用在超速离心机上，导致离心管在运行时破裂，样品液外溢造成失衡，使轴弯曲。

4.驱动轴和转子等材料有内伤未定期检测，导致离心机发生事故。

5.使用甩平转子时，不细心地将吊篮的序号与甩平转子主体的序号装错，影响转子的动平衡。

6.离心管帽内橡胶密封环和转子盖橡胶密封环使用不当和消毒不当，如长期使用内部断裂和高温消毒(使用干燥箱烘烤)等处理而老化龟裂等缺陷导致密封失效，样品在高速运转时外溢，引起转子在不平衡状态下运行。

7.由于工作中粗心大意，转子盖没有拧紧或是将转子盖和转子柄互换，造成螺纹不吻合，当开机运行时，转子盖抛出而发生严重的断轴事故。

8.离心管在装样时，因样品液未装满或离心管帽没有拧紧密封，在离心过程中离心腔内的高真空状态造成离心管变形、破裂和样品液外溢，造成转子不平衡而发生轴弯曲或断轴事故。

9.由于原样品的比重不等于配平液的比重，转子动平衡失调而发生事故。

10.管帽混用(两者比重不同)而发生事故。

11.对于各种材料的离心管，使用前没能仔细了解厂家要求的离心管使用范围和消毒方法，采用化学溶剂和不适当的消毒液处理，造成离心管在运行中溶胀、破裂而发生事故。

12.由于使用寿命管理不当和各种腐蚀损伤等，转子在运行中发生爆裂。

13.由于粗心大意，安装时未将驱动系统或其它系统的固定件去掉，并强行使仪器试运转而发生断轴和转子爆炸事故。

实验室科研过程中经常使用各种化学药品和仪器设备，会遇到有高低温、高低压的的实验条件和高电压、高频和带有辐射源的仪器设备，如果人员培训不足，很可能会导致安全事故。

东南仪诚提醒大家一定要注意加强安全意识，定期检测维护设备，积极预防准备工作，避免上述安全隐患。

如需了解更多仪器设备使用信息、详细参数和检测维护方法，欢迎登录实验室信息网或东南仪诚网站查看咨询。

近来,一条关于“单身女性不允许冷冻卵子或做试管婴儿?”的消息吸引了广大网友的注意。微博中,提到来自上海的李珺律师建议国家卫健委修改相关规范中不允许单身女性使用人工辅助生殖技术(例如冷冻卵子或试管婴儿)的规定。

对此,国家卫生健康委员会在接受媒体采访时表示,我国现行有关法律并未禁止单身女性生育,卫健委将加强调查研究,逐步凝聚共识,完善相关法律法规和政策措施,切实保障女性生育、就业和职业发展权益。

打开网络搜索,输入“冷冻卵子”,会看到国内外众多医学服务机构的广告。这些广告都称,这是一份面向拥有前瞻性思维的都市职业女性的生育保险。在年轻卵巢功能尚未衰退的黄金时期,预先保存“明天的希望”。还有的机构称,可以让中国有中高端消费能力的精英女性提前实现生育解放,远离高龄生育的困扰。

然而,事实真的如此吗?

为何选择冷冻卵子

冷冻卵子,是指在女性处于较佳生育年龄时,人工提取成熟的卵子加以冷冻保存。此前往往是因疾病,如染色体异常、自身免疫疾病、感染、肿瘤等因素导致卵巢早衰的女性需要这一服务。而由于女性生育期短暂,加上婚育年龄普遍推迟,因此,它又成为一种能让女性超越生理局限、推迟生育时间的解决方案之一。

在2015年,中国某女演员自曝在美国冷冻了9颗卵子,称冷冻卵子就像找到了“世界上唯一的后悔药”。这名演员的个人经历引发了关于生育治疗的讨论。

在国家卫生健康委员会针对上述律师建议的回复中,明确提到我国现行有关法律并未禁止单身女性生育,人口与计划生育法第十七条规定,公民有生育的权利。妇女权益保障法第五十一条规定,妇女有按照国家有关规定生育子女的权利。婚姻法也规定,非婚生子女享有与婚生子女同等的权利,任何人不得加以危害和歧视。个别地区如吉林省,在地方条例中还对单身女性生育进行了特别规定。下一步,将继续予以关注,加强调查研究,逐步凝聚共识,完善相关法律法规和政策措施,切实保障女性生育、就业和职业发展权益。

在北京某三级医院产科工作的廖医生对记者说,目前,冻卵技术主要帮助三类人:一是在取卵当天丈夫精子没取出来,或者因为特殊情况,丈夫不能够到现场的；二是需要将其提前保存的,如肿瘤放化疗之类会损伤到卵母细胞；三是因为特殊情况确实没有找到合适伴侣的,随着年龄的增长,卵母细胞质量下降,在卵巢功能减退之前把它存起来。

“我对冻卵表示谨慎乐观。毕竟卵母细胞冻存不如精液、胚胎的冻存那么稳定、成功率那么高,原则上医生不鼓励在没有特殊情况下去冻存卵母细胞。还是尽量在生育的年龄做生育的事。”有国外教育背景,也学习过冻卵相关知识的廖医生说。

不过,近年来国内尤其是北上广的都市大龄女性对这种方式的接受程度越来越高。而由于国内政策限制,有意“冻卵”的女性将目光投向国外。

在某金融公司担任要职的王女士过了30岁仍然单身,看着身边好友一个个结婚生子,而自己年龄越来越大,既担心错过优生优育年龄,又不想因为生育而“随便找个人嫁了”,于是向一些海外机构咨询,考虑出国旅游时冷冻卵子。

35岁的北京女性陆洋,是在结束了一段不稳定的感情关系后,下决心冻卵的。“如果我有一个能够立刻结婚的对象,当然会选择自然受孕,但如果这个人到我快40岁才出现,怎么办”?

刚满30岁时,陆洋还不着急。眼见已经35岁了,时间似乎越来越急迫,但她觉得近一两年内,自己很难再进入一段稳定的感情关系,她希望“至少给自己一个机会,有一个备用方案”。

王女士和陆洋并非个案。

究其原因,一方面是面对婚姻和生育压力,不少女性愿意通过冷冻卵子的方式来延缓自己的婚恋和生育时间；另一方面是部分职场女性为了规避“孕期”对工作的影响,而希望用此种方式赢得打拼事业的时间。而目前国内对冷冻卵子技术尚未完全放开,未婚女性或者有正常生育能力的夫妇不可冷冻保存卵子或胚胎,所以不少女性选择去国外“冻卵”。

声称“技术不会失败”

前不久,陆洋的一位闺蜜向她推荐了一个微信群,群里一百人左右,都是打算冻卵或做试管的女性。她参加了群里组织的一次线下聚会。在北京一个咖啡馆里,三十多位女性围坐一起,听一位做过冻卵的姑娘答疑解惑。

在这次交流会上,陆洋问对方,取了卵之后是如何存储的?是一颗颗地存,还是打包存?如果单颗存储,是不是意味着可以一颗颗使用,而不是一次性用完?陆洋记得,对方说,她也不能回答这个问题。

现在,陆洋知道,理论上卵子是分开存的,但因为损耗率高,如果需要保证一颗卵子今后可以解冻成功并顺利受孕,通常需要一起使用。

比起选择冻卵,对于在哪进行手术这个问题,陆洋感觉更费劲,“说得天花乱坠,不知道怎么选择”。

陆洋告诉记者,目前,在有冻卵需求的单身女性和掌握冻卵技术的国外医疗机构中间出现了五花八门的中介机构,“这些中介声称提供‘咨询、检查、介绍医院、冷冻卵子、保管甚至代孕’等一系列服务。有机构甚至声称成功率高达百分之百”。

根据朋友介绍以及相关广告,陆洋联系了名为“美国某生殖中心”的公司。“工作人员除了对自己的技术下了‘零失误’的保险外,还称自己不是中介而是正规的办事处,我才和他们进一步联系的。”陆洋说,这家机构称医院的年接诊量是1500例,有30年的历史,“但他们也表示成功率无法统计,冻卵没有失败率”。

不过,根据廖医生向记者提供的数据,冻卵技术应该有明确的活产率与妊娠成功率的说明。大体上,35岁以下的卵子活产率为60.6%,妊娠率为72%；35岁至37岁的卵子活产率为51.5%,妊娠率为63.9%。随着年龄的增长,卵子的活产率和妊娠率均有下降。

不过,随着咨询的深入,陆洋发现成功率也并非如机构所说的那么绝对保证。因为在介绍中,机构的工作人员虽称在他们的冻卵技术没有失败率,但是也强调能不能成功解冻要看卵子自身的质量,和技术没有关系。

“他们一再强调未来培育阶段是否能有优质的胚胎产生要看我本身的卵子质量和孩子父亲的精子质量,这不是医学手段可以控制的。当被问到国际上也曾经有解冻失败的案例,工作人员则再三强调‘技术不会失败,有这样的情况是由于您自己的卵子质量决定的而不是解冻失败’。”陆洋说,关于解冻后卵子的复苏率,不同的中介机构有不同的说法,但几家中介结构都声称能够保证80%的成功率。

除了高成功率的技术保证,无期限的冷冻保藏也令陆洋生疑。咨询中,上述机构加州生殖中心的工作人员承诺卵子保存没有期限,无论冷冻多少年,卵子的复苏率都相同。“还有中介称从现有的临床上来看,冷冻1年和冷冻5年的复苏是没有区别的,其他就不好说了”。

对此,廖医生的看法是,随着冷冻时间增加,卵子的质量有可能会受到影响,所以应尽早使用。目前,卵子冻存到一二十年的客观数据还比较少,“业内曾在小鼠卵母细胞的冻存上发现,高龄鼠冻存以后卵子损伤大；冻存时间长,复苏率偏低。时间越长,风险越增加”。

高额收费不知用在何处

按照陆洋的计划,在她40岁以前,也就是5年内用掉卵子。在医院,5年整存的费用是30万元人民币左右。不同医院的存卵费用各不一样。

根据目前中介机构给出的费用表:

冻卵技术的费用为1万至2万美元不等,从第二年开始,要一年支付600至800美元的保管费用。

不过,支付了高额的费用并不意味着就有百分百的回报率。尽管中介机构把成功率鼓吹到80%以上,但一旦出现失败,风险和后果要由个人承担。

在陆洋咨询过程中,某中介机构直接表明各国实施冻卵的医院都是不保证成功率的,冻卵的风险需要自己承担。

那么,高额的费用究竟用在哪里?

一位不愿具名的业内人士向记者解释,费用用在了检查、促排用药、取卵等环节,并且还称材料费和冷冻费就有3.5万元左右。

“根据中介机构的说法,从第二年开始,冷冻费就要重新收取,原来交的冷冻费能支撑多久?”陆洋说,这样的问题,至今没有中介给出满意的答复。

虽然如此,陆洋仍在努力寻找能够冻卵的可靠途径。她查阅资料了解到,《人类辅助生殖技术规范》也明确了“禁止给不符合国家人口和计划生育法规和条例规定的夫妇和单身妇女实施人类辅助生殖技术”；2015年,原卫生部又再次表示“我国单身女性不能使用冷冻卵子生育”。对于冷冻卵子的使用,必须要求当事人出具身份证、结婚证和准生证。

上海一家出境冻卵中介机构的创始人甚至觉得,“出境冻卵,渐渐成为了类似于周末和闺蜜喝下午茶一样的新生活方式”。

但由此衍生的便是,五花八门的中介。

“市面上所有提供给单身女性咨询冻卵技术的机构大部分都是中介,从介绍医院到服务报价一条龙服务,但既不承担手术实施,也不提供医疗保险凭证。说白了,中介只推荐医院。”陆洋说,还有的中介表明,介绍完医院以后,他们还会从中协助,如果是通过他们的机构选择的医院,会赠送一次当地的接送机和一次陪同首诊,也可以提供住宿和生活指导,并且也可以向该机构购买就医陪同和医疗用车服务,“不过,对于手术的流程和其他专业性的问题,除了介绍医院和医生,中介没有提到其他相关服务”。

在陆洋提供的中介发来的资料中,记者注意到大多数都是医生的独立实验室和诊所。“冻卵保存需要5到10年,独立工作室和小诊所能否长时间开放也是一个问题,等到10年后,是否还能拿到自己当初的冷冻的卵子?中介并没有向我保证。”陆洋说,而随着咨询的深入,她甚至发现不同中介机构介绍的是同一家医疗机构,“有两家中介机构都把我推向了某加州生殖中心,一家称自己是驻中国办公室,一家称是第三方平台,手术费用也有1000至2000美元的差距”。

除了冻卵,上述中介结构还提供代孕、捐卵等一系列服务。有中介机构称很多中国女孩在医院冻了一批卵子,分批次售卖给需要的客户,生下孩子的都很多了,她们冷冻的卵子一般都在3年以内就会被卖掉。

制图/李晓军

本报记者赵丽

来源：法制日报